365体育投注:上海药物研究所研究员陆晓杰课题组联合该所研究员赵玉军课题组、365体育投注:药科大学教授褚钱课题组，系统揭示了包含多种成环方法的环肽库筛选结果，并提出了不同的化合物挑选和验证方法。相关研究6月27日发表于《美国化学会会志-金》。

环肽因其独特的空间结构和生物活性，近年来在口服药物、多肽偶联药物、诊断试剂等领域展现出巨大的应用潜力。DNA编码化合物库技术（DELT）通过将特定的核酸标签与多肽分子连接，实现了大规模化合物库的快速构建和筛选，在引入各类非天然氨基酸和成环方法上具有先天的优势。以往的研究多采用单一环化策略构建化合物库，往往存在假阳性风险，且可能遗漏部分高活性分子，限制了筛选结果的全面性和准确性。

研究团队充分利用DELT的合成灵活性，设计并快速合成了8个环肽子库，共同组成了一个包含约1亿种不同环肽分子的超大规模环肽库。每个子库均采用相同的合成砌块组合，但通过不同的环化方法完成环肽骨架的构建。

DNA编码环肽库的构建及其亲和筛选流程。图片由研究团队提供

团队以肿瘤相关蛋白MDM2和蛋白-蛋白相互作用调控因子GIT1为代表靶点，开展了系统的筛选与验证实验。

在MDM2的筛选中，多个子库展现出高度一致的富集模式，特定氨基酸序列的环肽在不同环化策略下均被富集。这些序列相同但环化方式不同的环肽，均表现出优异的靶点结合能力，表明跨子库的结构富集模式可以显著提升筛选苗头分子的可靠性。研究团队同时发现，单一子库筛选可能低估了部分高活性分子的潜力，强调了多子库交叉分析的重要性。

针对GIT1的筛选则呈现出另一种典型情形，不同子库间未观察到一致的富集模式。团队筛选出两个环肽化合物进行验证，发现其中一个环肽能够特异性结合GIT1并有效阻断其与β-PIX的相互作用，而另一个分子则未显示出阻断活性。在此基础上，研究团队明确了关键结合位点。由此，面对单一富集结果，可以结合竞争性筛选、体外实验等多种手段，综合验证筛选命中分子的真实性和特异性。（来源：365体育投注:科学报 江庆龄）

相关论文信息：https://doi.org/10.1021/jacsau.5c00473